核酸實(shí)驗(yàn)室污染處理方案
一、核酸實(shí)驗(yàn)室介紹
核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室也就是我們所說的PCR實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室原則上分為4個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域，試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)，當(dāng)然有些實(shí)驗(yàn)室也會(huì)有擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)，標(biāo)本制備區(qū)的空間要大一點(diǎn)。
用換風(fēng)次數(shù)保證實(shí)驗(yàn)室的潔凈度，其實(shí)核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室要求最高的就是各個(gè)區(qū)域的正負(fù)壓，而且這些具備單相的人流、物流、和氣流。
二、核酸實(shí)驗(yàn)室污染處理方案（精選5篇）
核酸是由許多核苷酸聚合而成的大分子化合物，其實(shí)也是蛋白質(zhì)生物合成必不可少的物質(zhì)，是生物遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，份子結(jié)構(gòu)相對(duì)而言，隨著現(xiàn)在人們對(duì)病毒的認(rèn)識(shí)，核酸也越來越重要。以下是小編精心整理的核酸實(shí)驗(yàn)室污染處理方案（精選5篇），僅供參考，大家一起來看看吧。
核酸實(shí)驗(yàn)室污染處理方案1
目前國(guó)內(nèi)所有二級(jí)以上綜合醫(yī)院都具備了核酸檢測(cè)能力，大部分醫(yī)院也設(shè)立了PCR實(shí)驗(yàn)室，高強(qiáng)度的核酸檢測(cè)任務(wù)已然成為了我們檢驗(yàn)人的工作常態(tài)，但是，如果一旦出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室污染，可能會(huì)造成假陽性結(jié)果，導(dǎo)致結(jié)果不可信，甚至可能會(huì)危及實(shí)驗(yàn)室工作人員安全。
應(yīng)對(duì)核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室污染的最好辦法就是防患于未然，今天就帶大家了解一下實(shí)驗(yàn)中我們?nèi)绾伪苊夂蜏p少污染的產(chǎn)生以及處理污染。
一、污染的產(chǎn)生
在新冠病毒核酸檢測(cè)過程中，常見以下幾種污染類型：擴(kuò)增片段的污染（產(chǎn)物污染）；天然基因組DNA的污染、試劑污染（貯存液或工作液）以及樣本間交叉污染。核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室污染的主要來源是擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過以下途徑及時(shí)發(fā)現(xiàn)污染：
1、采用每次檢測(cè)過程至少3個(gè)陰性對(duì)照隨機(jī)置于臨床樣本中間參與提取全過程。
2、每天對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣進(jìn)行采樣監(jiān)測(cè)。空氣監(jiān)測(cè)范圍應(yīng)至少應(yīng)包括樣本制備區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
3、定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、門把手、儀器設(shè)備表面進(jìn)行取樣監(jiān)測(cè)。
4、陽性樣本采用另外一到兩種更為靈敏且擴(kuò)增不同區(qū)域的核酸檢測(cè)試劑對(duì)原始樣本進(jìn)行復(fù)核檢測(cè)。
二、污染的防控
01嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室功能分區(qū)
原則上新冠病毒核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)。
根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當(dāng)合并。各區(qū)域在物理空間上應(yīng)當(dāng)是完全相互獨(dú)立的。傳遞窗滿足密封性要求，不能有空氣的直接相通。各項(xiàng)檢測(cè)工作應(yīng)嚴(yán)格按相應(yīng)規(guī)定在各自的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，嚴(yán)禁在樣本制備區(qū)配制試劑。
各區(qū)的功能是：
1、試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的制備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。
2、樣本制備區(qū)：轉(zhuǎn)運(yùn)箱的開啟，樣本的滅活（適用時(shí)），核酸提取及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管等。
3、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)：核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。
02確保實(shí)驗(yàn)室人、物及空氣單向流動(dòng)
核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的人、物及空氣流向按照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)，防止擴(kuò)增產(chǎn)物隨人流、物流及空氣進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。空氣流向應(yīng)按照從試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進(jìn)行。
03實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)安全管理
（1）基本要求
核酸檢測(cè)應(yīng)當(dāng)在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，并應(yīng)在生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，采取適當(dāng)?shù)膫�(gè)體防護(hù)措施，包括手套、口罩和隔離衣等。開展新冠病毒核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)制定實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)程序文件及實(shí)驗(yàn)室生物安全操作失誤或意外的處理操作程序，并有記錄。
（2）實(shí)驗(yàn)室前安全要求
應(yīng)使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進(jìn)行桌面、臺(tái)面及地面消毒。消毒液需每天新鮮配制，不超過24小時(shí)。轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)桶應(yīng)在生物安全柜內(nèi)開啟。轉(zhuǎn)運(yùn)桶開啟后，使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)桶內(nèi)壁和標(biāo)本采集密封袋進(jìn)行噴灑消毒。取出標(biāo)本采集管后，應(yīng)首先檢查標(biāo)本管外壁是否有破損、管口是否泄露或是否有管壁殘留物。確認(rèn)無滲漏后，推薦用0.2%含氯消毒劑噴灑、擦拭消毒樣品管外表面（此處不建議使用75%酒精，以免破壞標(biāo)本標(biāo)識(shí)）。如發(fā)現(xiàn)滲漏應(yīng)立即用吸水紙覆蓋，并噴灑有效氯含量為0.55%的含氯消毒劑進(jìn)行消毒處理，不得對(duì)標(biāo)本繼續(xù)檢測(cè)操作，做好標(biāo)本不合格記錄后需立即進(jìn)行密封打包，壓力蒸汽滅菌處理后銷毀。
如為采樣管為非滅活管，實(shí)驗(yàn)室操作人員在進(jìn)行標(biāo)本熱滅活時(shí)，溫浴前需旋緊標(biāo)本采集管管蓋，必要時(shí)可用封口膜密閉管蓋；溫浴過程中可每隔10分鐘將標(biāo)本輕柔搖勻1次，以保證標(biāo)本均勻滅活；溫浴后標(biāo)本需靜置至室溫至少10分鐘使氣溶膠沉降，隨后再開蓋進(jìn)行后續(xù)核酸提取。
（3）核酸提取和檢測(cè)安全要求
標(biāo)本進(jìn)行核酸提取和檢測(cè)時(shí)應(yīng)盡可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作。如為打開標(biāo)本管蓋或其他有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作，則必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。
（4）實(shí)驗(yàn)室結(jié)束后清潔要求。
需要對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行清潔，消除可能的核酸污染。
①實(shí)驗(yàn)室空氣清潔。實(shí)驗(yàn)室每次檢測(cè)完畢后，可采用房間固定和/或可移動(dòng)紫外燈進(jìn)行紫外照射2小時(shí)以上。必要時(shí)可采用核酸清除劑等試劑清除實(shí)驗(yàn)室殘留核酸。
②工作臺(tái)面清潔。每天實(shí)驗(yàn)后，使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進(jìn)行臺(tái)面、地面清潔。
③生物安全柜消毒。實(shí)驗(yàn)使用后的耗材廢棄物放入醫(yī)療廢物垃圾袋中，包扎后使用0.2%含有效氯消毒液或75%酒精噴灑消毒其外表面。手消毒后將垃圾袋帶出生物安全柜放入實(shí)驗(yàn)室廢棄物轉(zhuǎn)運(yùn)袋中。試管架、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器等使用75%酒精進(jìn)行擦拭。隨后關(guān)閉生物安全柜，紫外燈照射30分鐘。
④轉(zhuǎn)運(yùn)容器消毒。轉(zhuǎn)運(yùn)及存放標(biāo)本的容器使用前后需使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進(jìn)行擦拭或噴灑消毒。
⑤塑料或有機(jī)玻璃材質(zhì)物品清潔：使用0.2%含氯消毒劑或過氧乙酸或過氧化氫擦拭或噴灑。
（5）轉(zhuǎn)運(yùn)容器消毒
轉(zhuǎn)運(yùn)及存放樣本的容器使用前后需使用有效氯含量為0.2%的消毒劑或75%酒精進(jìn)行擦拭或噴灑消毒。
04強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過程控制
實(shí)驗(yàn)室接到樣本后，應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)對(duì)樣本進(jìn)行清點(diǎn)核對(duì)。按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行試劑準(zhǔn)備、樣本前處理、核酸提取、核酸擴(kuò)增、結(jié)果分析及報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)建立可疑樣本和陽性樣本復(fù)檢的流程。
（1）試劑準(zhǔn)備
應(yīng)當(dāng)選擇國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門批準(zhǔn)的試劑，并在選擇樣本采樣管和核酸提取試劑時(shí)，使用試劑盒說明書上建議的配套樣本采樣管和提取試劑。
（2）樣本滅活
已經(jīng)使用含肌鹽的滅活型樣本采樣管的實(shí)驗(yàn)室，這一環(huán)節(jié)無需進(jìn)行滅活處理，直接進(jìn)行核酸提取。使用非滅活型樣本采樣管的實(shí)驗(yàn)室，可采用56℃孵育30分鐘熱滅活的處理方式。
（3）核酸提取
將滅活后的樣本取出，在生物安全柜內(nèi)打開樣本采樣管加樣。核酸提取完成后，立即將提取物進(jìn)行封蓋處理。在生物安全柜內(nèi)將提取核酸力口至PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系中。
（4）核酸擴(kuò)增
將擴(kuò)增體系放入擴(kuò)增儀，核對(duì)擴(kuò)增程序是否與試劑說明書相符，啟動(dòng)擴(kuò)增程序。擴(kuò)增后的反應(yīng)管不要開蓋，直接放于垃圾袋中，封好袋口，按一般醫(yī)療廢物轉(zhuǎn)移出實(shí)驗(yàn)室處理。
三、污染的消除
實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生污染，檢測(cè)工作應(yīng)立即停止，直到確認(rèn)消除污染后才能重新開始檢測(cè)。首先，要查找污染源和明確污染范圍。然后，根據(jù)污染源和污染范圍采取有效的去污染措施，結(jié)合各種不同方法以達(dá)到最佳效果。
實(shí)驗(yàn)室污染的處理：
1.標(biāo)本污染生物安全柜的操作臺(tái)造成局限污染時(shí)：立即用吸水紙覆蓋，并使用0.55%含氯消毒劑進(jìn)行噴灑消毒。消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，24小時(shí)內(nèi)使用。
2.標(biāo)本傾覆造成實(shí)驗(yàn)室污染時(shí)：
保持實(shí)驗(yàn)室空間密閉，避免污染物擴(kuò)散。立即使用潤(rùn)濕有0.55%含氯消毒劑的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時(shí)（如大量溢撒時(shí)）可用過氧乙酸加熱熏蒸實(shí)驗(yàn)室，劑量為2g/m，熏蒸過夜；或20g/L過氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧，用量8ml/m，作用1-2小時(shí)；必要時(shí)或用高錳酸鉀-甲醛熏蒸：高錳酸鉀8g/m，放入耐熱耐腐蝕容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）10ml/m，熏蒸4小時(shí)以上。熏蒸時(shí)室內(nèi)濕度60%-80%。
3.清理污染物時(shí)：
嚴(yán)格遵循活病毒生物安全操作要求，采用壓力蒸汽滅菌處理，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室換氣等，防止次生危害。
核酸實(shí)驗(yàn)室污染處理方案2
發(fā)現(xiàn)污染第一步就是要暫停實(shí)驗(yàn)，評(píng)估假陽性對(duì)以往檢測(cè)結(jié)果的影響。對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行徹底打掃和清理，盡可能更換相關(guān)的試劑耗材，對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行清潔和去核酸處理。
1.化學(xué)處理法
使用商品化的核酸去除劑，核酸去除劑是一種非堿性、無腐蝕性的核酸去除溶液，對(duì)人體無害的非致癌性物質(zhì)組成，通過對(duì)基礎(chǔ)RNA和DNA的非可逆性摧毀，達(dá)到去除核酸污染的目的。對(duì)人體無毒無害。
2.物理處理法
使用紫外燈照射。
核酸污染處理的難點(diǎn)
1.移液器
移液器內(nèi)部被污染很難去除，可以通過清洗或者另?yè)Q一套移液器。
2.生物安全柜
移除內(nèi)部所有物品，用核酸去除劑擦拭表面后，打開柜門連續(xù)運(yùn)行。
3.核酸提取儀內(nèi)部
用核酸去除劑擦拭內(nèi)表面后，打開提取儀門或外罩，靜置。
如果能及時(shí)發(fā)現(xiàn)污染，通常情況不會(huì)太嚴(yán)重，采取上述措施實(shí)驗(yàn)室空置幾天污染會(huì)消除。但是如果發(fā)生了很嚴(yán)重的污染，采取上述措施污染仍不能消除，就要采取專業(yè)的設(shè)備方案進(jìn)行去除：
歐菲姆核酸干霧消毒器，采用獨(dú)有的干霧發(fā)散遠(yuǎn)離，配合低溫冷蒸發(fā)技術(shù)，可以將核酸去除液發(fā)散成平均粒徑1微米的顆粒。均勻的擴(kuò)散在空氣中，無死角的覆蓋在整個(gè)核酸實(shí)驗(yàn)室，并快速吸附空氣中的氣溶膠，分解掉核酸污染源。
歐菲姆核酸去除干霧消毒器適用于微生物實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物房實(shí)驗(yàn)室、PCR實(shí)驗(yàn)室、P3及P4實(shí)驗(yàn)室，是當(dāng)下國(guó)內(nèi)去除PCR實(shí)驗(yàn)室核酸污染的`佼佼者。
核酸實(shí)驗(yàn)室污染處理方案3
疫情在全球的大流行對(duì)各國(guó)公共衛(wèi)生和全球經(jīng)濟(jì)造成嚴(yán)重威脅，了解和遏制新冠病毒的環(huán)境傳播模式對(duì)各國(guó)制定相關(guān)公共衛(wèi)生政策至關(guān)重要。早發(fā)現(xiàn)并進(jìn)行流動(dòng)性管控是快速控制新冠病毒傳播的方法，新冠病毒核酸熒光定量PCR檢測(cè)由于其高靈敏度和準(zhǔn)確性成為公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)。
在新冠病毒檢測(cè)中，核酸檢測(cè)結(jié)果是主要的判定依據(jù)，而分子實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的清潔程度是保證核酸檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確的必要條件。高效DNA清除劑能夠降解長(zhǎng)片段核酸和PCR后短片段核酸產(chǎn)物，經(jīng)過電泳未見明顯條帶；通過qPCR檢測(cè)核酸剩余量，顯示清除效率達(dá)到了99.9%；對(duì)桌面、儀器等表面處理，其表面累積的核酸量也有很明顯的降低。DNA清除劑為分子實(shí)驗(yàn)室日常清潔處理和已發(fā)生核酸污染的實(shí)驗(yàn)室處理提供了解決思路。
分子診斷實(shí)驗(yàn)室常見的消毒殺菌方法：
1、紫外光照射和高壓滅菌來處理實(shí)驗(yàn)耗材中的DNA污染，有實(shí)驗(yàn)證明，高壓滅菌（128℃，420min）后，再次干燥，暴露于10~60J/cm2的紫外光照射下能夠清除，但此方法耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)并且紫外線透射度有限、高壓滅菌對(duì)耗材有選擇性等局限。
2、無菌醫(yī)療產(chǎn)品常用環(huán)氧乙烷（EO）氣體來滅菌，通過EO處理3h可使PCR擴(kuò)增的DNA減少104個(gè)數(shù)量級(jí)，因此利用EO來阻止DNA擴(kuò)增的方法是有效的，但是EO并不能完全清除DNA污染，且作用后會(huì)有副產(chǎn)物遺留，導(dǎo)致這種方法難以在分子實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。
因此，需要尋求一種更便捷的辦法來預(yù)防或減少核酸污染。核酸清除劑是目前市面上商品化使用的專門清除核酸污染的試劑，針對(duì)性強(qiáng)、效果好且毒性小。潤(rùn)聯(lián)環(huán)保旗下的諾沃賽德核酸清除液，諾沃賽德Novocide是國(guó)內(nèi)唯一一款可以用于空間噴霧的核酸去除劑，試劑特點(diǎn)：不含過氧化氫，PH值接近中性，不含酶，強(qiáng)效的DNA的片段捕捉粘合劑，腐蝕性極低。
諾沃賽德核酸污染去除液，能夠強(qiáng)力高效的去除實(shí)驗(yàn)室中核酸污染問題。搭配比林科漢核酸污染清除儀能夠達(dá)到1+1>2的效果。比林科漢核酸污染清除儀采用獨(dú)特的干霧發(fā)散原理，超高速噴射，可以將核酸清除劑發(fā)散成小于1微米的顆粒，均勻擴(kuò)散到空氣中，以氣溶膠的形式捕獲核酸片段并分解掉污染源。其優(yōu)點(diǎn)是覆蓋面積廣，納米級(jí)干霧滲透性好，氣溶膠均勻擴(kuò)散，智能化系統(tǒng)，單位用量少成本低。非常適合分子診斷實(shí)驗(yàn)室去除核酸污染。
核酸實(shí)驗(yàn)室污染處理方案4
由于疫情的突發(fā)，各地PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)也逐步加快，病毒核酸檢測(cè)是診斷的重要標(biāo)準(zhǔn)，pcr實(shí)驗(yàn)室又稱為基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室，利用分子生物學(xué)技術(shù)，通過放大核酸片段，也可以看做是生物體外的特殊核酸復(fù)制。利用基因追蹤系統(tǒng)，掌握人體內(nèi)部的病毒含量，試驗(yàn)的精確度可達(dá)到納米級(jí)別，核酸檢測(cè)也屬于此類技術(shù)，診斷的重要標(biāo)準(zhǔn)。
PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室主要就是對(duì)檢測(cè)核酸模板進(jìn)行擴(kuò)增，由此可見，易出現(xiàn)的就是對(duì)實(shí)驗(yàn)室交叉污染而導(dǎo)致檢測(cè)的標(biāo)本出現(xiàn)假陽性結(jié)果，所以，PCR實(shí)驗(yàn)室對(duì)預(yù)防交叉污染有著嚴(yán)格的設(shè)計(jì)要求和標(biāo)準(zhǔn)。
現(xiàn)在PCR技術(shù)已經(jīng)在傳染病、腫瘤靶向、生殖遺傳等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用，但因?yàn)樵摷夹g(shù)對(duì)待測(cè)核酸進(jìn)行了多次、大量的擴(kuò)增，所以即使極微量的污染也容易導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)假陽性；其次PCR技術(shù)要求相對(duì)較高，實(shí)驗(yàn)過程繁復(fù)，中間環(huán)節(jié)如果出現(xiàn)遺漏疏忽，就有可能導(dǎo)致結(jié)果假陰性。
PCR實(shí)驗(yàn)過程中易發(fā)生污染產(chǎn)生污染主要有以下4個(gè)原因：
1、是PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。這也是見的污染原因。PCR產(chǎn)物經(jīng)反復(fù)多次的擴(kuò)增，其復(fù)制量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過PCR的檢測(cè)極限，所以即使是極微量的污染也足以造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果假陽性。
2、試劑的污染。在試劑的配制過程中，接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導(dǎo)致試劑被污染。
3、待測(cè)樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴(yán)導(dǎo)致樣品與外界接觸被污染；其次在核酸提取過程中使用了被污染的移液器或槍頭導(dǎo)致樣品被污染；另外，某些樣品中含毒，若彌散到空氣中則有可能形成交叉污染。
4、氣溶膠污染。若氣溶膠中包含病毒等污染物擴(kuò)散至空氣中極有可能造成PCR產(chǎn)物污染。氣溶膠是由空氣與液體表面摩擦而產(chǎn)生的，開蓋、晃動(dòng)反應(yīng)管及污染加樣器的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠從而導(dǎo)致交叉污染。據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆粒可含48000拷貝，因此，應(yīng)尤其重視由氣溶膠導(dǎo)致污染的問題。PCR實(shí)驗(yàn)室只要出現(xiàn)了污染，之前的結(jié)果報(bào)告就變?yōu)闊o效而且也無法進(jìn)行其他的實(shí)驗(yàn)操作。必須找出并清除污染源，才能得到準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
Pcr實(shí)驗(yàn)室如何進(jìn)行空間消毒預(yù)防污染？
針對(duì)pcr實(shí)驗(yàn)室的消毒，法國(guó)進(jìn)口的歐菲姆干霧滅菌設(shè)備，采用先進(jìn)的過氧化氫干霧滅菌技術(shù)，達(dá)到枯草芽孢桿菌2.5×10的6次方的殺滅率。方便快捷，滅菌時(shí)間快，腐蝕性極低，安全無殘留。
法國(guó)歐菲姆過氧化氫干霧滅菌器采用了進(jìn)的霧化技術(shù)，霧化顆粒小于3微米，增效了空間擴(kuò)散均勻性，迅速?gòu)浡錆M整個(gè)空間，不放過每一處死角，滅菌效果。適應(yīng)大空間滅菌，小空間滅菌更靈活。
歐菲姆過氧化氫滅菌優(yōu)勢(shì)：
1、殺菌效果好，對(duì)嗜熱脂肪桿菌芽孢10分鐘有6個(gè)對(duì)數(shù)值的殺滅率，快速高效去除實(shí)驗(yàn)室核酸污染源。
2、廣譜的殺菌能力，能殺滅包括病原菌、芽孢、及病毒在內(nèi)的200多種微生物。
3、干霧顆粒，擴(kuò)散性非常優(yōu)良，能擴(kuò)散到每一個(gè)衛(wèi)生死角落，在空氣中做不規(guī)則布朗運(yùn)動(dòng)。
4、無殘留，安全可靠，分解。驗(yàn)證資料齊全，提供驗(yàn)證模板。
5、殺菌時(shí)間超短，設(shè)備體積小，操作方便，靈活移動(dòng)滿足不同空間需求，適應(yīng)大空間滅菌。
核酸實(shí)驗(yàn)室污染處理方案5
近年來，核酸檢測(cè)技術(shù)在我國(guó)得到逐步的推廣和應(yīng)用，并已成為血液篩選查實(shí)實(shí)驗(yàn)室的重要實(shí)驗(yàn)手段，但因其靈敏度高的特點(diǎn)，同時(shí)實(shí)驗(yàn)室也容易導(dǎo)致污染，特別是核酸的氣溶膠污染比較嚴(yán)重。如何預(yù)防和處理PCR核酸實(shí)驗(yàn)室污染為本文討論的重點(diǎn)。
關(guān)鍵詞：分子診斷，核酸檢測(cè)，核酸污染，DNA，RNA，PCR，DNA測(cè)序，原位雜交，SNP，基因芯片，假陽性。
核酸污染是困擾絕大多實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)難題。微量的核酸污染會(huì)產(chǎn)生假陽性的檢測(cè)結(jié)果，這樣會(huì)對(duì)病人造成誤診，耽誤病情。如任由此情況發(fā)展，會(huì)形成氣溶膠污染而擴(kuò)散，終導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的污染，嚴(yán)重的會(huì)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，如無備用實(shí)驗(yàn)室，會(huì)造成更大的損失。是否有一種快速?gòu)氐椎慕鉀Q方案呢？且看下面。
分子診斷是指利用分子生物學(xué)方法來檢測(cè)樣品中遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化從而做出相應(yīng)診斷的技術(shù)。由于分子生物技術(shù)的發(fā)展，人們生活水平不斷提高記憶對(duì)健康問題更為重視，分子診斷得以迅猛發(fā)展，市場(chǎng)份額快速提高。我國(guó)分子診斷產(chǎn)業(yè)雖然起步較晚，但現(xiàn)已與歐美，日本，新加坡等起步較早的國(guó)家之間的的差距也越來越小。
而由于日常檢測(cè)中要處理大量的不同來源的核酸以及核酸本身難以降解的特性，核酸污染是困擾絕大多實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)難題。微量的核酸污染會(huì)產(chǎn)生假陽性的檢測(cè)結(jié)果，這樣會(huì)對(duì)病人造成誤診，耽誤病情。如任由此情況發(fā)展，會(huì)形成氣溶膠污染而擴(kuò)散，終導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的污染，嚴(yán)重的會(huì)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，如無備用實(shí)驗(yàn)室，會(huì)造成更大的損失。
在與核酸污染長(zhǎng)期抗?fàn)幹校藗円部偨Y(jié)出了一些預(yù)防和清除核酸污染的方法。對(duì)于預(yù)防，實(shí)驗(yàn)人員一定要不斷改進(jìn)并嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)室操作流程，對(duì)實(shí)驗(yàn)室不同操作進(jìn)行區(qū)域劃分，分裝試劑，定期對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行滅菌，實(shí)驗(yàn)室適當(dāng)通風(fēng)，養(yǎng)成實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行陰陽對(duì)照的好習(xí)慣。
當(dāng)污染已經(jīng)出現(xiàn)，傳統(tǒng)的清除方法包括對(duì)可疑器用稀酸進(jìn)行擦拭或浸泡，紫外線照射，對(duì)反應(yīng)液用DNaseⅠ或內(nèi)切酶進(jìn)行處理等方法。這些方法對(duì)一些微量污染會(huì)有一定效果，但對(duì)污染效果不是很理想，而且紫外線照射會(huì)對(duì)人體造成一定的危害。
污染傳統(tǒng)處理方法：
準(zhǔn)備（1：50）、（1：10）高效消毒液，75%無水酒精。
2.5.1把STAR上的所有載架都拿出來，用1：50的高效消毒液進(jìn)行擦拭，待作用五分鐘后用清水沖洗。
2.5.2SATR內(nèi)部用噴壺噴灑75%無水酒精，底部金屬部分可用1：50的高效消毒液進(jìn)行擦拭，待酒精完全沉降后，用清水擦拭。
2.5.3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作臺(tái)用1：10的高效消毒液進(jìn)行擦拭，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部用噴壺噴灑1：50的高效消毒液，等待空氣中的高效消毒液沉降后，用1：50的高效消毒液拖地，建議當(dāng)天不用清水擦拭或拖地，待第二天早上來再用清水擦拭拖地。
2.5.4實(shí)驗(yàn)室用的耗材（除用自封袋封好的），能滅菌的，均用備用滅菌鍋進(jìn)行一次滅菌。
2.5.5機(jī)器通道污染的處理，將配置好的高效消毒液（1：50）代替裂解液，加入裂解液槽里，完成加裂解液的過程，在機(jī)器每次吸取一定量的高效消毒液后，暫停十分鐘，讓高效消毒液揮發(fā)到通道內(nèi)部，反復(fù)四次即可，這個(gè)過程中用的槍尖同樣不帶濾芯。后將裂解液槽里的高效消毒液（1:50）用水洗凈后換上蒸餾水重復(fù)以上程序。（此類方法正常情況下不建議使用，只有在污染去除不了時(shí)才慎重使用。用該方法處理過機(jī)器后，當(dāng)天不再做核酸實(shí)驗(yàn)）。
總之，對(duì)于核酸污染大家一定要給予足夠的重視，提前預(yù)防，不要等到污染已經(jīng)出現(xiàn)才想辦法清除，經(jīng)常在實(shí)驗(yàn)室中配備清除污染的試劑，發(fā)現(xiàn)污染可馬上進(jìn)行處理，相信這樣核酸污染將不再是讓眾多實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問題。
注：實(shí)驗(yàn)室的污染不可能一次就清理干凈，需反復(fù)清理驗(yàn)證，直到實(shí)驗(yàn)結(jié)果能被采用為止。
核酸實(shí)驗(yàn)室污染的主要原因有：
1）標(biāo)本污染；2）試劑污染；3）產(chǎn)物污染；5）其他污染。
其解決措施為：其解決措施為：
1）標(biāo)本污染，重新采樣進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)估標(biāo)本前處理環(huán)節(jié)；
2）試劑污染，更換新的試劑重新檢測(cè)評(píng)估；
3）設(shè)備污染，設(shè)備整體消毒清潔、維護(hù)；
4）產(chǎn)物污染，全面清潔消毒實(shí)驗(yàn)室、儀器設(shè)備所有實(shí)驗(yàn)有關(guān)用品。一旦發(fā)生污染后，圍繞實(shí)驗(yàn)室尋找污染源分析污染原因耗時(shí)且很繁瑣，所以防止污染重在預(yù)防。
因核酸實(shí)驗(yàn)室污染后極其難以清除，有可能造成實(shí)驗(yàn)室不能使用的風(fēng)險(xiǎn)。但是如果一旦出現(xiàn)核酸實(shí)驗(yàn)室污染，除了上面常規(guī)的消毒清潔方法之外，另外還有一種比較好使而且快速全面徹底的實(shí)驗(yàn)室空間滅菌方法。根據(jù)國(guó)外DNA研究所大量實(shí)踐證明空間熏蒸消毒確實(shí)有效去除核酸污染源，時(shí)間短、高效、安全、節(jié)省勞動(dòng)力等等優(yōu)點(diǎn)。此空間熏蒸消毒方法為法國(guó)過氧化氫干霧消毒技術(shù)，整體核酸實(shí)驗(yàn)室覆蓋，無死角，快速分解掉核酸污染源，消毒完后，隨著排風(fēng)即可清除而無殘留，省時(shí)省力。特別適用核酸實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染。
在眾多的過氧化氫消毒技術(shù)當(dāng)中，據(jù)大數(shù)據(jù)得知，法國(guó)的過氧化氫干霧消毒技術(shù)由oxypharm制造的消毒機(jī)力壓群雄，成為行業(yè)消毒去除PCR實(shí)驗(yàn)室核酸污染的佼佼者。（高效并且持久）
法國(guó)oxy過氧化氫干霧消毒方案的精妙之處在于的解決方案，巧妙利用了特別的干霧設(shè)備+過氧化氫殺孢子劑（高純低濃度）的完美配合，組成無懈可擊空間消毒方案，避免了過氧化氫蒸汽的腐蝕性和解決了擴(kuò)散性問題。
oxypharm過氧化氫消毒器采用獨(dú)到而特殊的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，使得在僅僅輸入電能的情況下，集壓縮、ventur噴射和霧滴內(nèi)外部濺射碎化功能于一體，使專用液態(tài)殺孢子劑變成氣霧狀態(tài)極微小顆粒噴出，高速極小微粒與空氣接觸后充分氣化，變成氣態(tài)過氧化氫即為“干霧”。此干霧具備良好的擴(kuò)散性和細(xì)菌殺滅效果。
此過氧化氫干霧消毒器的特點(diǎn)為：
1、滅菌效果好，生物指示劑挑戰(zhàn)降低6lg對(duì)數(shù)值，能徹底殺滅環(huán)境中的MRSA、VRE、結(jié)核分枝桿菌、芽孢、病毒和多重耐藥的革蘭陰性菌（鮑曼不動(dòng)桿菌）；
2、活性氫氧基團(tuán)能高效分解DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物質(zhì)；
3、快速空間滅菌，比起噴霧或熏蒸所需要的時(shí)間更短，實(shí)現(xiàn)更快速的密閉空間滅菌措施，預(yù)防核酸實(shí)驗(yàn)室環(huán)境空氣污染及核酸片氣溶膠污染，及快速高效去除實(shí)驗(yàn)室核酸污染源；
4、小于3微米干霧氣體，擴(kuò)散性優(yōu)越，能擴(kuò)散到每一個(gè)角落，空氣中做布朗運(yùn)動(dòng)，消毒干霧無孔不入，專門對(duì)付小分子核酸污染源物質(zhì)；
5、消毒干霧相對(duì)一般過氧化氫穩(wěn)定，自然損耗小，維持的滅菌濃度均勻，基本不受溫度、環(huán)境濕度的影響（真正的干霧才能做到這點(diǎn)）；
6、無色無毒，無殘留，安全可靠，當(dāng)天使用消毒清除污染，當(dāng)天即可使用實(shí)驗(yàn)室，換回?fù)p失。
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