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什么是脾氣虛
現代醫學研究表明,傳統中醫學的“脾”不僅僅是一個簡單的解剖學概念,而且是人體最大的淋巴網狀內皮系統[9]。脾氣虛與免疫低下存在一定的關系。本研究發現,氣虛發熱組脾臟的質量平均值均比正常組輕,形態體積縮小,質地變硬,說明氣虛發熱組的免疫能力較正常組低,與諸多文獻報道的結果相符合。對脾臟進行組織病理學檢查發現,氣虛發熱組家兔脾臟局部組織有灶狀多核巨細胞浸潤,并見肉芽腫性病變,而正常組組織結構正常。
氣虛證除有脾胃氣虛的一面,還有致熱的因素,氣虛發熱乃是氣虛、感邪二者綜合的病理反映[3]。總的來說,氣虛發熱是脾臟、肺臟的病理結果,皮膚是氣虛發熱的外在表現。現代研究發現,脾虛證患者在胃腸道形態學、胃組織細胞內細胞器密度數量、細胞內能量代謝、胃腸道黏膜保護性屏障作用、消化系統功能、胃腸道激素水平、免疫功能及植物神經功能等方面均存在不同程度的異常[4]。從皮膚組織形態觀察目前主要是觀察表皮、 彈力纖維和膠原纖維[5-7]。本實驗從組織形態學方面進行研究,探討氣虛發熱對皮膚、肺臟、脾臟的影響,結果更直觀,對臨床用藥具有一定的指導意義。
1材料與方法
1.1動物
新西蘭兔4只,普通級,體質量1.8~2.2 kg,許可證號:SCXK(粵)2008-0020,購于廣州中醫藥大學實驗動物中心。
1.2試劑
脂多糖[lipopolysaccharides(LPS) 055∶B5,L2880,Sigma公司];無水乙醇(AR,天津市百世化工有限公司,批號:20081108);95%(φ)乙醇 (AR,天津市大茂化學試劑廠,批號:20080407);二甲苯(AR,天津市富宇精細化工有限公司,批號:20081106);甲醛溶液(天津市科盟化工工貿有限公司,批號:20080423);切片石蠟(中國上海標本模型廠,批號:20070912)。
1.3HE染色染色劑的制備[8]
1.3.1Mayer蘇木精染液配制方法蘇木素1 g,鋁明礬1 g,檸檬酸1 g,水合氯醛50 g,碘酸鈉200 mg,蒸餾水1 000 mL。先將蘇木素加入煮沸的蒸餾水內攪拌充分溶解后再依次加入鋁明礬和碘酸鈉至鋁明礬全部溶解,然后再加水合氯醛、檸檬酸加熱煮沸5 min,冷卻后過濾,隔日即可使用。
1.3.21%伊紅的配置方法取1 g伊紅,溶于99 mL蒸餾水中,即成1%(ρ)伊紅水溶液。
1.4儀器
EG 1160石蠟包埋機、RM 2255石蠟切片機、TEC-2500石蠟切片漂烘儀(均為德國LEICA產品);LKB 2188型超薄切片機(NOVA);倒置光學顯微鏡 (日本Olympus)。
1.5方法
1.5.1家兔氣虛發熱證模型的制備篩選體溫在38.5~39.5℃的正常家兔,隨機分為正常組與氣虛發熱組,每組各2只。氣虛發熱組家兔禁食1周,但不禁水,氣虛模型建立成功后,腹腔注射LPS 80 μg/kg建立家兔氣虛發熱模型(結果另文報道);正常組常規飼養。然后每隔0.5 h測1次體溫,連續監測8 h。實驗過程中動態觀察家兔的活動情況和精神狀態。
1.5.2石蠟組織切片的制備根據立題切取相應的器官并進行組織切片、染色與觀察。
取材與固定→沖洗→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片、展片、貼片和烤片→脫蠟→復水→染色→透明→封片→觀察與拍照。
2結果
2.1動物狀態
氣虛發熱組:在對氣虛發熱組家兔進行禁食不禁水飼養后,氣虛發熱組家兔出現懶動、蜷臥、喜擠堆取暖,體質量下降,爪甲色淡,毛發疏散,干枯無澤,腹部、頭部毛發呈塊狀脫落,活潑性差,易抓回籠,排便偶出現稀便現象。用體溫計測肛溫正常。注射LPS后2 h開始發熱,4 h后發熱更明顯,呼吸急促,眼結膜充血,耳廓潮紅,耳根部灼熱,食量減少;6 h后體溫繼續上升,出現氣喘,鼻煽,不食,精神萎頓,大部分家兔出現稀便現象。正常組:家兔活動良好,排便正常,毛發有光澤,長短一致,爪甲紅潤;體質量稍增;用體溫計測肛溫正常。
2.2臟器檢查
2.2.1肺臟正常組肺臟呈粉紅色,肺胸膜平坦光滑有光澤,肺小葉間質分明,觸摸柔軟,有彈性,無顆粒感,切面既不干燥亦不明顯濕潤,用手擠壓,有少量淋巴液、血液滲出。氣虛發熱組氣管和各級支氣管黏膜假復層柱狀纖毛上皮均有不同程度損傷,支氣管腔內有多少不等的分泌物,肺泡壁增厚,毛細血管充血,個別肺實質內有灶狀出血。
2.2.2脾臟正常組脾臟的切面、濾泡、小梁和紅髓清晰可見,濾泡只在45 ℃的視線下才能見到極細的顆粒;小梁呈灰白色,細條狀;紅髓組織略柔軟,用刀輕刮不脫落。氣虛發熱組脾臟質量平均之后較正常組輕,包膜肥厚皺縮,脾小梁紋理粗大而明顯。
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