微生實驗報告8篇
在現實生活中,接觸并使用報告的人越來越多,不同種類的報告具有不同的用途。我們應當如何寫報告呢?下面是小編為大家收集的微生實驗報告,供大家參考借鑒,希望可以幫助到有需要的朋友。
微生實驗報告1
第十次實驗分離產淀粉酶微生物
學院:生命科學學院
專業:生物科學類
年級:20xx級
姓名:
學號:1007040085
20xx年XX月XX日
實驗十分離產淀粉酶的微生物
一、實驗目的
1、熟悉常用微生物培養基(牛肉膏蛋白胨培養基)的配制方法。
2、學習各種無菌操作技術,并用此技術進行為微生物稀釋分離、劃線分離接種。
3、用平板劃線法和稀釋涂布平板發分離微生物。
4、認識為微生物存在的普遍性,體會無菌操作的重要性。
5、掌握分離產淀粉酶微生物的試驗方法和步驟,了解產淀粉酶的微生物種類及形態。
二、實驗原理
土壤是微生物生活的大本營,是尋找和發現有重要應用潛力的微生物的主要菌源。不同土樣中各類微生物數量不同,一般土壤中細菌數量最多,其次為放線菌和霉菌。一般在較干燥,偏堿性、有機質豐富的土壤中放線苗數量較多;酵母菌在一般土壤中的數量較少,而在水果表皮、葡萄園、果園土中數量多些。本次實驗從土壤中分離產淀粉酶的微生物,應該取那些富含產淀粉酶的微生物的土樣。從復雜的微生物群體中獲得只含有一種或某一類型微生物的過程稱為微生物的分離與純化。常用的方法有
1、簡單單細胞挑取法
2、平板分離法和稀釋涂布平板法
此次實驗采取的是平板分離法和稀釋涂布平板法結合,該方法操作簡單,普遍用于微生物的分離與純化。其原理包括:
1)稀釋后的細胞懸液圖不在平板上可以分離得單個菌株
2)在適合于待分離微生物的生長條件(如營養、酸堿度、溫度與氧等)下培養微生物,或加入某種抑制劑造成只利于待分離微生物的生長,而抑制其他微生物生長的環境,從而淘汰一些不需要的微生物。
3)微生物在固體培養基上生長形成的單個菌落可以是由一個細胞繁殖而成的集合體。因此可通過挑取單菌落而獲得純培養。獲得單菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等方法完成。
以淀粉作為惟一碳源的培養基培養未分離細菌,能產淀粉酶的細菌能生長,且菌落周圍出現透明圈(淀粉不透明,被消化后變透明),則產淀粉酶微生物被分離出來。本實驗采用透明圈檢驗法檢測培養物中是否有產淀粉酶微生物的生長。
三、實驗儀器及試劑
1、器材:
培養皿、載玻片、蓋玻片、普通光學顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、燒杯、三角瓶、酒精燈、玻璃棒、接種環、鑷子、恒溫培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、、天平、濾紙、pH試紙等。
2、試劑:
配制牛肉膏蛋白胨培養基的原料(牛肉膏、NaCl、瓊脂、蛋白胨)、淀粉、盧戈氏碘液、蒸餾水、250ml三角瓶中裝90ml無菌水加20粒玻璃珠,作稀釋用等。
3、土樣:
取自貴州大學農生樓后土壤10g,地下10cm左右。
四、實驗步驟:
1、配制牛肉膏蛋白胨培養基:
1)配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基400ml(用于11個平皿和7支試管斜面)牛肉膏0.5%…………………………………2g
蛋白胨1%……………………………………4g
NaCl0.5%…………………………………..2g
瓊脂2%……………………………………..8g
淀粉0.5%........................................2g
pH……………………………………7.0~7.2
(2)無菌水的制備
分別取9ml蒸餾水加入5支試管中,加塞后用報紙包扎捆綁,放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌備用。取90ml蒸餾水加入250ml三角瓶中,同樣的操作,滅菌備用。
(3)器皿的準備
將刻度吸管用報紙包扎,培養皿裝入專用滅菌杯分別放入高溫滅菌箱滅菌備用。
2)倒11個平板和7支試管斜面,包扎,0.1Mp、121℃、滅菌30min.
2、制備土壤稀釋液:
稱取土樣10g,放入盛有250ml無菌水的帶有玻璃珠的三角瓶中,振蕩搖勻10min使土和水充分混合,然后用移液槍從三角瓶中吸取1ml(此操作要求無菌操作),加入另一盛有9ml無菌水的試管中,混合均勻,以此類推分別制成制成0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001不同稀釋度的土壤溶液。
3、涂布培養:
0.00001、0.000001濃度的土壤稀釋液作為涂布平板培養的對象,將其分別涂布在3個牛肉膏蛋白胨培養基中,共6個培養基,標號,37°C溫箱培養48h。
4、選取目的菌株:
兩天后對土壤溶液的微生物培養基進行觀察,并取兩個菌落形態完全一致的分散的單個菌落,對其中一個噴灑盧戈氏碘液,觀察其菌落周圍是否出現透明圈,如果出現透明圈說明此菌株產淀粉酶,是目的菌株,記錄細菌明顯的性狀。
微生實驗報告2
實驗名稱:用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動
一、實驗目的
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態和分布
二、實驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細胞中的細胞質處于不斷的流動狀態,觀察細胞質的流動,可以用細胞質基質中的葉綠體的運動做為標志。
三、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養皿,鉛筆
四、實驗過程(見書p30)
1.制作蘚類葉片的臨時裝片
2.用顯微鏡觀察葉綠體
3.制作黑藻葉片臨時裝片
4.用顯微鏡觀察細胞質流動
五、討論
1.細胞質基質中的葉綠體是否靜止不動,為什么?
2.葉綠體的形態和分布與葉綠體的功能有什么關系?
3.植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態,這對于活細胞完成生命活動有什么意義?
4.用鉛筆畫一個葉片細胞,標出葉綠體的大致流動方向。
微生實驗報告3
為加強醫院病原微生物實驗室生物安全管理工作,確保醫院平安目標的實現,我院檢驗科根據xxxx省《病原微生物實驗室生物安全管理條例》的相關內容,對醫院實驗室安全管理工作進行了自查,對涉及病原微生物菌(毒)種及樣本的人員進行了培訓,提高他們生物安全的意識,掌握必要的生物安全知識。
一、實驗室生物安全管理工作、各項規章制度的運行情況
醫院檢驗科根據《病原微生物實驗室生物安全管理條例》的相關規定進行學習,并定期對有關生物安全各項規章制度的運行情況進行檢查,對存在的問題及時進行整改。實驗室所從事的實驗活動均嚴格遵守有關的國家標準和實驗室技術規范、操作規程,并指定專人監督檢查實驗室技術規范和操作規程的落實情況。同時,對檢查情況進行詳細記錄,定期召開會議討論工作中發現的問題,及時糾正。
二、病原微生物菌(毒)種的管理及運輸
因各方面條件限制我院現不能開展病原微生物實驗室生物的檢查,根據通知要求積極組織相關人員主要學習了:病原微生物實驗室菌(毒)種的管理嚴格登記制度,收到菌(毒)種后立即進行編號登記,詳細記錄菌(毒)種的名稱、來源、特性、用途、批號、傳代日期、數量。在菌(毒)種的管理,安全保衛制度,安全保衛措施,保管過程中,傳代、分發及使用,均應及時登記,定期核對庫存數量。菌(毒)種在進行銷毀時,滅菌指示標志,滅菌效果,同時做好銷毀登記等內容。
三、實驗室生物安全突發事件的處理工作
在此次自檢中,我院實驗室對以前制訂的處置意外事件的應急指揮和處置體系,進一步進行了修訂,使之能滿足實際工作的需要。
針對當發生自然災害(如地震、水災等)或設施出現故障時,我們制定了可能遇到的緊急情況及其處理原則。
同時規范了菌(毒)種外溢在臺面、地面和其他表面的的處理原則、皮膚刺傷(破損)的處理原則、離心管發生破裂的處理原則并建立了意外事故報告制度。
在實驗室的顯著位置張貼了實驗負責人、實驗室工作人員、消防、醫院、公安、工程技術人員、水、電氣維修部門電話。
四、提高意識,加強學習
組織檢驗人員對《病原微生物實驗室生物安全管理條例》進行全面系統的學習,同時加強了實驗室的準入制度的管理,標明實驗室類型、負責人及其聯絡方式。加強了個人安全防護,并要求檢驗人員嚴格遵守標準的操作規程進行檢驗。
通過這次對微生物實驗室生物安全管理工作自查,提高了全體檢驗人員對微生物實驗室生物安全管理工作重要性的認識,加強管理,采取有效措施,確保實驗室工作安全。
微生實驗報告4
一、實驗名稱:
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞
二、實驗材料:
顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片,及其他細胞裝片。
三、實驗步驟:
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座,把顯微鏡向著光放在實驗臺上。
2、對光:轉動轉換器,使低倍物鏡對準通光孔。
3、調節載物臺下的反光鏡,從目鏡往下看,能看見亮的光圈。
4、觀察:調節粗準焦螺旋,把所要觀察的洋蔥表皮切片放在載物臺上,用壓片夾夾住,標本要正對通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內看,同時轉動粗準焦螺旋等,直到看清切片上的細胞為止,最后整理器材。
四、使用注意事項:
1、取送顯微鏡時,應右手握住鏡臂,左手托住鏡座,輕拿輕放。
2、鏡檢時,坐姿端正,一般用左眼觀察物象,用右眼看著實驗報告紙畫圖。兩眼須同時睜開。
3、切忌一面從目鏡進行觀察,一面使鏡筒下降,這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調節焦距時,切勿使用粗調節器,以免壓壞標本,損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒,移開鏡頭后再取出玻片標本,以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。
五、實驗原理:
利用教學顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。
六、創新點:
在實驗過程中為學生提供多種細胞裝片,以供學生操作、觀察,增加了學生動手實驗的時間,使學生在實驗中經歷調節顯微鏡的焦距的過程,從而熟練掌握教學教學顯微鏡的`使用方法。
微生實驗報告5
一、實驗名稱
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動
二、實驗目的
1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2、觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態和分布
三、實驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細胞中的細胞質處于不斷的流動狀態,觀察細胞質的流動,可以用細胞質基質中的葉綠體的運動做為標志。
四、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養皿,鉛筆
五、實驗過程(見書p30)
1、制作蘚類葉片的臨時裝片
2、用顯微鏡觀察葉綠體
3、制作黑藻葉片臨時裝片
4、用顯微鏡觀察細胞質流動
六、討論
1、細胞質基質中的葉綠體是否靜止不動,為什么?
2、葉綠體的形態和分布與葉綠體的功能有什么關系?
3、植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態,這對于活細胞完成生命活動有什么意義?
4、用鉛筆畫一個葉片細胞,標出葉綠體的大致流動方向。
微生實驗報告6
一、實驗目的
(一)掌握一般培養基的制備原理及要求,掌握培養基酸堿度的測定,熟悉一般培養基的制備過程和各種器皿滅菌方法。
(二)掌握細菌分離培養的基本要領和方法,掌握細菌抹片的制備方法和革蘭氏染色法及油鏡的使用方法,并認識革蘭氏染色的反應特性。
(三)掌握學習用微生物學原理診斷疾病的一般方法及步驟。
二、實驗用品
(一)器材
量筒、燒杯、電子天平、漏斗、三角燒瓶、空試劑瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、ph試紙、紗布、脫脂棉、天平、電爐、試劑瓶瓶塞、扎繩、放大鏡、包裝紙、洗耳球、酒精燈、載玻片、火柴、吸水紙、剪刀、記號筆、接種環、注射器、鑷子、鉗子、毫米尺、培養箱、水浴培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、油鏡
(二)試劑及材料
肘胨、蛋白胨、豬膽鹽、氯化鈉、瓊脂、乳糖、0.01%結晶紫水溶液、0.5%中性紅水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氫氧化鈉、鹽酸、牛血清、革蘭氏染色液、蒸餾水、小白鼠、病豬內臟
三、實驗步驟
(一)培養基的制備
(所有用到的器皿都已121℃高壓滅菌15~30min,傾注平板在無菌操作臺內完成,并放在無菌操作臺內)
1、麥康凱培養基
(1)組成:蛋白胨17g、肘胨3g、豬膽鹽5g、氯化鈉5g、瓊脂17g、乳糖10g、0.01%結晶紫水溶液10ml、0.5%中性紅水溶液5ml、蒸餾水1000ml
(2)方法:將蛋白胨、肘胨、豬膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中,調節ph至7.2。將瓊脂加入600ml蒸餾水中,并加入乳糖,加熱熔化。將兩液混合,分裝于燒瓶內,用紗布、扎繩等捆好后,121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時,加入結晶紫和中性紅水溶液,搖勻后傾注平板。
注:結晶紫和中性紅水溶液配好后需經高壓滅菌。
2、血清平板
(1)組成:營養瓊脂、牛血清
(2)方法:將滅菌的營養瓊脂加熱熔化,冷卻至45~50℃時,加入牛血清,并混勻,傾注平板。
注:不得將牛血清一并加入后再滅菌。
3、lb培養基
(1)組成:胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、瓊脂15g
(2)方法:在950ml蒸餾水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、瓊脂和氯化鈉,調節ph至7.4,加熱熔化,分裝于瓶中,用紗布、扎繩等捆好后,121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時,傾注平板。
4、液體培養基(在lb培養基的基礎上,裝入大試劑瓶中,不加瓊脂,不分裝)
(二)病料取材
在病豬死亡后,首先用顯微鏡檢查其末梢血液膜片中是否有炭疽桿菌存在,未發現,則立即用消毒的器械對其進行生理解剖,觀察其病理特征現象,取出病豬的十二指腸、胃、肝臟三處的組織物,并注意組織的完整性,用儲物袋密封保存。
(三)細菌粗培養
1、消毒滅菌:操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套,再用消毒水對無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。
2、接種
(1)在無菌操作臺酒精燈旁打開用儲物袋密封保存的病料,先左手持鑷子右手持剪刀,把病料剪出一個小口。
(2)右手持滅過菌的接種環,左手持平板,并用拇指、食指及中指將平皿揭開約20左右,然后將接種環前端插入小口旋轉一下后,再用劃線接種的方法接種到一個血清平板上。
(3)用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、部位等標記,并將平板倒放。
以此方法,分別接種十二指腸、胃粘膜、肝臟于血清平板上,各接種2個血清平板。
3、培養:將接種好的血清平板倒扣放入37℃培養箱中,反向培養24小時。注:劃線接種時盡量劃開,以保證長出單個菌落,且劃線時接種環應盡量傾斜,以免劃破培養基(后同);待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈,關閉好無菌操作臺窗口,打開無菌操作臺內的紫外燈。 。
(四)細菌純培養
1、菌落特征判斷
待粗培養的細菌培養24小時后,取出用放大鏡觀察記錄單個小菌落的形態特征并用實驗報告紙記錄好,并在平板底部上做好觀察標記,其形態特征包括大小、形狀、菌落邊緣、表面構造、隆起度、濕潤度、透明度、顏色等。
2、取單個菌落進行革蘭氏染色鏡檢
(1)取干凈的載玻片,用記號筆在其一面做好正反面標記,再在載玻片另一面中央滴上一小滴蒸餾水。
(2)將接種環在火焰上滅菌,待冷卻后,在酒精燈旁從標記的單個小菌落中取少許細菌置于蒸餾水中混勻(同時蓋好平板倒扣置于一旁),用接種環涂成直徑約1.5cm的菌膜,再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細菌,待冷卻進行染色。
(3)先滴加草酸結晶紫溶液染色1~2min,再水洗;然后滴加革蘭氏碘液溶液染色1~2min,再水洗;隨后滴加95%的酒精脫色30~60s,再水洗;最后滴加稀釋的品紅進行復染30~60s,再水洗;待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。
(4)將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下,滴加一滴松柏油進行鏡檢,觀察其形態特征,判斷細菌的種屬。
3、細菌接種培養
(1)消毒滅菌:操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套,再用消毒水對無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。
(2)接種:右手持滅過菌的接種環,左手持平板,并用拇指、食指及中指將平皿揭開約20左右,然后將接種環插入揭開的平板口內蘸去一下鏡檢標記的小菌落,再用劃線接種的方法接種到一個血清平板、lb平板或麥康凱平板上。并用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、菌種、部位等標記,將平板倒放。
(3)將接種好的平板倒扣放入37℃培養箱中,反向培養24小時。
注:油鏡用完后應立即清理物鏡上的松柏油;劃線接種時盡量劃開,以保證長出單個菌落;待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈,關閉好無菌操作臺窗口,打開無菌操作臺內的紫外燈。 。
(五)菌液的制備
1、鏡檢:用革蘭氏染色法在1000倍油鏡下鏡檢,觀察并記錄是否為純培養的細菌。
2、分裝液體培養基:先對無菌操作臺及需要使用的器械進行消毒滅菌,然后用鉗子揭開一個空試劑瓶,用傾倒的方法在酒精燈旁從液體培養基大試劑瓶中分裝于空試劑瓶內,并立即蓋上液體培養基大試劑瓶瓶塞。
3、接種:右手持接種環,用火焰對其進行滅菌,待冷卻后,取出純培養的平板,在無菌操作臺內酒精燈旁,蘸去少許細菌,左手傾斜液體培養基,將接種環,伸入液體培養基內攪動,然后取出對接種火焰環滅菌,并用滅菌的包裝紙捆綁好后,用記號筆做好相應標記,置于一旁。
4、培養搖菌:將接種好的液體培養基置于水浴培養箱中培養24小時。注:分裝一個培養基就接種一個培養基,不得全部分裝完后再一個一個接種。
(六)小鼠致病性實驗
1、保定:選擇健康的青壯年小白鼠,先用右手抓住尾巴,旋轉數周讓其眩暈,然后用左手的拇指和食指捏住兩耳及頭部皮膚,并翻轉左手,使其頭部朝下,以達到內臟前移的目的。
2、接種:先用酒精棉球蘸取酒精對注射部位擦洗消毒,再用注射器注射吸取0.2ml菌液注射于小白鼠腹腔中。
3、觀察:將接種的小白鼠放在適宜的環境下生活,并在鼠籠處用記號筆標記好接種時間、菌種等。
4、再培養鑒定:待小白鼠死亡后,對其進行解剖,觀察其內臟病變情況,并取肝臟直接涂在相應培養基上,在適宜條件下反向培養24小時后,取菌落細菌進行鏡檢觀察判斷。
注:在注射小白鼠2小時候需要觀察小白鼠是否因注射時傷害到內臟而死亡。
微生實驗報告7
霉菌的培養與形態學觀察:實驗一真菌培養基的配制與滅菌
實驗目的:
(1)了解培養基的配置原理和方法,掌握分離培養微生物的有關準備工作。
(2)掌握高壓滅菌方法及原理
實驗原理:
(1)培養基的制備原理:
培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。
從營養角度分析:
營養:碳源、氮源、能源、生長素、水分和無機鹽等;?適宜的酸堿度(pH值)和一定緩沖能力;?一定的氧化還原電位;?合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質,是應用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養基在98~100℃下融化,于45℃以下凝固,不容易被微生物污染。但多次反復融化,其凝固性降低。
(2)濕熱滅菌原理-高壓蒸汽滅菌
在密閉的蒸鍋內,其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,使水的沸點不斷提高,從而鍋內溫
度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下,鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。
實驗材料與方法
配制培養基所需器材
實驗設備:高壓蒸汽滅菌器。
實驗器材:500ml三角燒瓶、藍蓋瓶、5ml刻度吸管、培養基、天平、砝碼、
稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。
培養基等集中放講臺前高壓桶內,送到洗刷室統一高壓滅菌條件及注意事項
高壓滅菌條件:121.3℃,15min。含糖培養基113℃,15min。
倒平板電爐加熱滅菌好的培養基打開平皿包裝倒平板(10塊)注意事項:空氣環境無菌(應在酒精燈火焰周圍無菌區)。
a.在酒精燈火焰處,傾斜打開瓶口。
b.瓶口要過火焰。
c.左手掀開平皿小口。
d.傾注滿皿底再多一點,約10ml(7cm直徑平皿)。
e.推放一邊要輕緩,不能晃起瓊脂掛壁,易在培養過程中污染雜菌。
f.完全凝固再翻轉平板放塑料筐內,4℃備用。
分析與討論
(1)如何證明培養基滅菌是否徹底?
把滅菌后的培養基按滅菌鍋內的不同位置,每處抽取數管(瓶),標上記號,置25℃~30℃培養一周左右進行檢查。如果培養基沒有什么變化,說明滅菌效果良好;如果某一位置的培養基出現了雜菌菌落,可能是擺放的太緊,導致蒸汽不暢,或鍋的結構不合理等原因所致,應根據上述情況進行改進;如果大部分或全部菌種瓶都出現雜菌,說明滅菌溫度或滅菌時間不夠,應提高壓力或延長滅菌時間。經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。
經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。
(2)為什么說消毒與滅菌是微生物學和臨床醫學必不可少的基本知識?由于病原生物廣泛存在于自然界,可通過不同途徑和媒介進入人體,引起感染或造成疾病流行。因此,殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物,對于切斷傳播途徑、預防和控制其感染具有重要意義。自古以來,人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物,達到預防疾病的目的。實際上,除了在臨床醫療實踐中需要防止微生物的污染或感染外,在微生物學實驗室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產等過程中都需要避免微生物的污染。
實驗二霉菌的接種與培養
實驗目的與要求:掌握霉菌與酵母菌的接種與培養方法。
實驗原理:
接種是微生物實驗及科學研究中一項基本操作技術。根據實驗目的和要求,
選擇合適的接種工具與接種方法,接種工具有接種環、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有:斜面接種,液體接種,穿刺接種,平板接種和固體接種。接種的關鍵是無菌操作。
無菌操作的原則:在酒精燈火焰旁進行,所有器皿均須嚴格消毒,培養基應事先做無菌試驗,
接種工具使用前后須經火焰燒灼滅菌,棉塞不能亂放,始終夾在手指中。在培養四大類微生物時應注意選擇適宜的培養條件。多數細菌為專性需氧菌與兼性需氧菌,少數為厭氧菌。多數食品腐敗菌和工業用菌種,以及人和動物病原菌的最適生長溫度為37℃,并且在近中性(PH6.5~7.5)條件下生長良好。多數放線菌為好氧菌,少數為厭氧菌,最適生長溫度為28~30℃,多數適宜在偏堿性環境中生長(PH7.5~8.5)。
實驗材料與方法
(1)實驗材料:實驗設備:溫箱。
實驗器材:毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細黃鏈霉菌、PDA平板、高鹽察氏平板、高氏合成I號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無菌蓋玻片、無菌濾紙、無菌載玻片、石棉網、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。
(2)實驗方法:平板接種:毛霉→PDA平板(點植法)
啤酒酵母→PDA平板(五區分離劃線法)青霉、曲霉→PDA平板(連續劃線法)
小室載玻片培養法:
1、取滅菌后小室平皿。
2、取無菌PDA瓊脂薄層平板,用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5~1.0cm2的瓊脂塊,并將其移至培養小室中的載玻片上,制作過程注意無菌。
3、用接種環取少量霉菌的孢子接種于培養基四周,用無菌鑷子
將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上,并(轉載于:l滅菌的20%甘油(用于保持濕度),蓋上皿蓋,標記,置28~30℃培養3~5d
糧食產品的平板接種:
1.取糧食樣品20g,放入無菌燒杯,加無菌水洗滌,
反復10次,棄去水后,將糧粒倒于平皿內備用2.鑷子取糧食種入PDA瓊脂內,每皿可接種5-10粒。
放線菌的接種:取細黃鏈霉菌劃線法接種,在接種的劃線處,無
菌操作斜插入蓋玻片數張。
注意事項:
1.空氣環境無菌(應在酒精燈火焰周圍無菌區)
2.在酒精燈火焰處,傾斜打開瓶口。
3.接種環使用前,直接在酒精燈上燒灼滅菌,把環和金屬絲燒紅即可。
4.接種環使用后,先在火焰周圍把環上標本烤干,再燒灼滅菌,以免標本汽化,爆烈四濺,污染環境。5.金屬桿快速通過火焰2-3次,殺滅表面微生物
分析與討論
1、糧食中產毒真菌的種類及產生毒素?
青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細黃鏈霉菌(放線菌)青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細黃鏈菌素
2、常用霉菌培養基有哪些?
馬鈴薯蔗糖培養基
豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)瓊脂培養基察氏培養基
3、霉菌的接種方法有何不同?為什么?
(1)連續劃線法(青霉、曲霉)
青霉與曲霉為局限性生長的霉菌。應采用連續劃線接種法接種。(2)點植法(根霉、毛霉)
根霉與毛霉生長區域比較大,應采用點植法。(3)小室載玻片培養法(青霉、毛霉、根霉、曲霉)
實驗三霉菌的制片與形態觀察
實驗目的:學習并掌握觀察霉菌形態的基本方法;
了解四類常見霉菌的基本形態特征。了解放線菌的基本形態特征。
實驗原理:霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線菌粗得多(約為3-10μm),常是細
菌菌體寬度的幾倍至幾十倍,因此,用低倍顯微鏡即可觀察。霉菌菌絲較粗大,細胞易收縮變形,且孢子容易飛散,所以制標本時常用乳酸石炭酸棉藍染色液,用此染液做霉菌制片的特點是細胞不變形,具有殺菌、防腐作用,不易干燥,能保持較長時間,能防止孢子四處飛散,棉蘭具有一定的染色作用,染液的藍色能增大反差。
實驗材料:
(一)菌種:在馬鈴薯瓊脂平板上培養3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉(Mucorsp.)、根霉;
(二)器材及用具:鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。
實驗方法:
(一)直接制片觀察
于潔凈載玻片上,用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲,然后小心地蓋上蓋玻
片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察,必要時再換高倍鏡(二)小室培養觀察
將載玻片直接放低倍鏡下觀察,再換高倍鏡觀察。
觀察原則:
毛霉:用低倍鏡觀察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀察孢子囊孢子的形
狀、大小。
根霉:菌絲、孢子同毛霉,注意觀察有無假根。
曲霉:在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜,分生孢子著生位置,辨認分生孢
子梗、頂囊、小梗和分生孢子。
青霉:在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜,分生孢子梗、副枝、小梗和分生
孢子的形狀等。實驗結果:
分析與討論:
青霉和曲霉的形態有哪些異同?
青霉常分布在霉腐變質的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上,菌體直立菌絲的頂端長有掃帚狀的結構,結構的每一個分枝上,生有成串的孢子,成熟的孢子呈青綠色,進行孢子生殖。
曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中,曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀,球狀結構的表面放射狀地生有成串的孢子,孢子隨曲霉種類的不同而呈黃色、橙色或黑色。
從皮膚取材查真菌如何檢查?
微生實驗報告8
實驗名稱:
觀察洋蔥表皮細胞。
實驗目的:
1、學習制作洋蔥表皮玻片標本。
2、學會使用顯微鏡觀察洋蔥表皮,用圖畫記錄觀察到的洋蔥表皮細胞。
3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。
實驗重點:
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。
實驗難點:
正確使用顯微鏡。
實驗準備:
分組實驗器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。 實驗過程:
一、導入課題
出示洋蔥。問:如果從它的內表皮上揭下一塊,用顯微鏡來觀察能看到些什么呢?(板書課題)
二、制作洋蔥表皮玻片標本
1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標本的方法與步驟。
(1)在一個干凈的玻璃載片中間滴一滴清水;
(2)用小刀在洋蔥鱗葉片內壁劃一個“井”字,用鑷子取下“井”中洋蔥內表皮放到載玻片的水滴中央,注意標本要平展開,不能折疊;
(3)用蓋玻片傾斜著蓋到標本上面,放蓋玻片時,先放一端,再慢慢放下另一端,注意不要有氣泡。如水不足,可沿蓋玻片邊緣滴加;若水分過多,可用吸水紙吸掉;
(4)從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒,并把玻片微微傾斜,再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水;
(5)洋蔥表皮玻片標本做成可進行觀察。
2、學生以組為單位自制玻片標本(最好制三份裝片,便于下面的對比觀察),教師巡視指導(教育學生注意安全)。
三、觀察洋蔥表皮細胞
1、先用肉眼觀察洋蔥表皮將看到的內容畫在科學記錄本上。
2、再用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的內容畫到科學記錄本上。
3、學生交流用肉眼和放大鏡分別觀察到什么?它們有何不同?
4、利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。
(1)、出示顯微鏡,引導學生認識顯微鏡,簡介各部分的名稱、功能及使用方法,學生每5人一組操作熟悉顯微鏡。
(2)、各組利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。(師操作演示:安放――對光――上片――調焦――觀察。生一步步跟著操作。)
(3)、學生觀察、記錄、描畫洋蔥表皮細胞。教師巡視指導,各組的實驗組長監督組員操作是否規范,要求每個人都要操作、都要觀察,并將觀察結果進行交流。組長將大家在顯微鏡下的發現畫到科學記錄本上。
5、全班交流在顯微鏡下的發現。
(1)各組推薦發言代表談自己的發現。
(2)各組將所畫的觀察結果向全班展示。
(3)交流討論評價。
6、師小結:我們發現放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細節更多,更清楚。我們發現洋蔥表皮是由一個個比較規則的多邊形組成的,而且大多呈長方形,外為細胞壁,內為無色細胞質和細胞核。洋蔥表皮上的一個個小房間似的結構,就是洋蔥的細胞。(師一邊描述一邊畫洋蔥細胞簡圖)
四、實驗結束。
回收實驗器材,整理實驗桌。
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