生物化學的實習報告

　　實習報告

　　院 系:專 業(yè)：應 用 化 學學 號： 姓 名： 指導教師：任梅蓉 李靖 趙宇 賈璐 日 期：201x年06月21日

　　序言

　　生物化學是用化學的原理和方法，研究生命現象的學科。通過研究生物體的化學組成、代謝、營養(yǎng)、酶功能、遺傳信息傳遞、生物膜、細胞結構及分子病等闡明生命現象。

　　生物體內幾乎所有的化學反應都是酶催化的。酶的作用具有催化效率高、專一性強等特點。酶的結構與功能的關系、反應動力學及作用機制、酶活性的調節(jié)控制等是酶學研究的基本內容。通過X射線晶體學分析、化學修飾和動力學等多種途徑的研究，一些具有代 表性的酶的作用原理已經比較清楚。70年代發(fā)展起來的親和標記試劑和自殺底物等專一性的不可逆抑制劑已成為探討酶的活性部位的有效工具。多酶系統中各種酶的協同作用，酶與蛋白質、核酸等生物大分子的相互作用以及應用蛋白質工程研究酶的結構與功能是酶學研究的幾個新的方向。酶與人類生活和生產活動關系十分密切，因此酶在工農業(yè)生產、國防和醫(yī)學上的應用一直受到廣泛的重視。

　　生物化學對其他各門生物學科具有深刻的影響，最緊密的有細胞學、微生物學、遺傳學、生理學等領域。通過對生物高分子結構與功能進行深入的研究，揭示了生物體物質代謝、能量轉換遺傳信息傳遞、光合作用、神經傳導、肌肉收縮、激素作用、免疫和細胞間通訊等許多奧秘，使人們對生命本質認識躍進到一個嶄新的階段。應用一直受到廣泛的重視。

　　分離純化意義：（1）分離大分子，研究其結構與功能，對于了解生命活動規(guī)律有重要意義（2）滿足工業(yè)生產的需要（3）滿足醫(yī)療的需要（4）滿足基因工程的需要生物體內幾乎所有的化學反應都是酶催化的。酶的作用具有催化效率高、專一性強等特點。酶的結構與功能的關系、反應動力學及作用機制、酶活性的調節(jié)控制等是酶學研究的基本內容。通過X射線晶體學分析、化學修飾和動力學等多種途徑的研究，一些具有代 表性的酶的作用原理已經比較清楚。70年代發(fā)展起來的親和標記試劑和自殺底物等專一性的不可逆抑制劑已成為探討酶的活性部位的有效工具。多酶系統中各種酶的協同作用，酶與蛋白質、核酸等生物大分子的相互作用以及應用蛋白質工程研究酶的結構與功能是酶學研究的幾個新的方向。酶與人類生活和生產活動關系十分密切，因此酶在工農業(yè)生產、國防和醫(yī)學上的應用一直受到廣泛的重視。

　　生物大分子的分離純化一般可以分為以下幾個階段：○1材料的選擇和預處理；○2破碎細胞及提取；○3分離和純化：包括粗分級分離和細分級分離；其中前兩個階段為生物大分子分離純化的前處理。

　　離心的.原理：將樣品放入離心機轉頭的離心管內，離心機驅動時，樣品液就隨離心管做勻速圓周運動，于是就產生了一個向外的離心力。由于不同顆粒的質量，密度，大小及形狀等彼此各不相同，在同一固定大小的離心場中沉降速度也就不同，由此便可以得到相互間的分離。受到的力：離心力、介質的摩擦阻力、浮力、重力及重力浮力(均可忽略不計)

　　本次試驗包括“各谷物中營養(yǎng)成分的測定”和“苯丙氨酸解氫酶的純化及活性測定”兩個試驗。

　　苯丙氨酸解氨酶（L-phenylalanine：ammonie lyase，簡稱PAL；EC4.3.1.5）是植物體內苯丙烷類代謝的關鍵酶，與一些重要的次生物質如木質素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等的合成密切相關。在植物生長發(fā)育和抵制病菌侵害的過程中起重要作用。PAL催化L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸在290nm處有強大的吸收值。規(guī)定1h內增加0.01為PAL的一個活力單位。酶的比活力是指樣品中每毫克蛋白所含的酶活力單位數。在實驗中將會看到隨著PAL的逐步被純化，其比活力也在逐步增加。

　　在蛋白質溶液中加入一定量的中性鹽（如硫酸銨、硫酸鈉等）使蛋白質沉淀析出稱為鹽析。溶液的鹽濃度通常以鹽溶液的飽和度表示，飽和溶液稱100%飽和度。沉淀一種酶所需的具體濃度需要經試驗確定。

　　谷類含蛋白質在8-12%之間，因谷粒外層蛋白質較里層含量高，因此，精制的大米和面粉因過多的去除外皮，使蛋白質含量較粗制的米和面低。谷類脂肪含量較少，約2%，但玉米和小米可達到4%,主要存在于糊粉層及谷胚中。大部分為不飽和脂肪酸，還有少量磷脂。胚芽油中含有較多的維生素E，有抗氧化作用。

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